人體的細胞有很多,不同的細胞在作用上都是不同的,因此對細胞也是需要進行全麵認識,這樣的人體細胞出現問題的時候,都知道它對人體健康有著怎麼樣的損害,人體各部位的喜歡是不一樣的,而且數量上也是不同,那上皮細胞是什麼呢,在這個問題上也是很多人不太清楚的。
很多人低上皮細胞是什麼並不了解,對這類問題都是可以進行詳細谘詢,使得對上皮細胞培養的時候,都是知道該選擇什麼樣的方法最佳,同時不會損害自身健康。
上皮細胞是什麼:
上皮細胞培養
1)表皮細胞培養
1.取材:取外科植皮或手術殘餘皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。
2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鍾。
3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。
4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。
5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊後,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鍾。
6.用吸管輕輕反複吹打,使成細胞懸液。
7.培養液:通過80目不鏽鋼紗網濾過後,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,製成細胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養。
2)乳腺組織培養
直接培養法:(適於培養含纖維少的軟組織)
1.在含有少量培養液或Hanks液的容器中,用鋒利刀片將組織反複切割成碎塊。
2.把組織碎塊連同液體注入離心管中,再補加少許培養液,用吸管吹打片刻,置試管架3~5分鍾。吸除上層液可排除非乳腺細胞部分。重複2~3次。
3.末次處理結束後,向沉降管中再補加培養液,用吸管稍吹打,使沉降物重懸。不待細胞團塊下降立即通過3~4層無菌紗布濾入另管中。
4.調整好適宜密度,接種入培養瓶中培養。
膠原酶消化法:(適於處理含纖維多的較硬組織)
其過程與培養其它組織相同。
3)胃上皮細胞培養
1.取材:取胃潰瘍或胃癌手術切除胃標本遠端非病變區粘膜少許。
2.清洗:用含慶大黴素(400微克/毫升)和二性黴素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗後,用鈍器剝離下粘膜,剪成1mm3大小。
3.消化:在I型膠原酶和透明質酸酶中,於37℃中消化80分鍾。
4.離心:收集細胞懸液,800轉/分離心後,Hanks液漂洗兩次。
5.接種:末次離心後加入含有1%~2%胎牛血清的完全培養基,接種入不同孔數的培養板中,接種量依不同實驗目的而定。
4)肝細胞培養
初代組織塊培養:取新鮮肝髒,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝髒剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養法。
5)內皮細胞培養
1.取產後的新鮮臍帶。如不立即培養可以保存於4℃中,但不宜超過12小時。無菌剪取長10~15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管,亦可用於培養。
2.先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中,洗除殘血,注入口處宜用線繩結紮,以防液體返流。
3.用血管鉗夾緊臍帶一端,從另端向臍靜脈中徐徐注入最終濃度為0.1%的膠原酶,待末端出現液體後結紮之,令充滿血管,注入口亦應結紮,以防液體返流,消化3~10分鍾。
4.吸出含有內皮細胞的消化液,注入離心管中,為獲取更多細胞,可再注入溫PBS衝洗2~3次徹底清除幹淨殘餘細胞,一並注入離心管中離心。
5.吸除上清,加1640培養液,製成細胞懸液,接種入瓶皿中培養,順利時2~3天內細胞即可長成單層。
通過以上介紹,對上皮細胞是什麼呢,也是有著一些介紹,上皮細胞培養的方法是什麼呢,都是有著詳細說明,不過在對它培養的時候,不能強行進行,要根據自身需求進行選擇,這樣對人體各方麵,才會有很好的幫助。