眼弓形體病檢查
一、檢查:
弓形體感染的診斷主要根據典型的眼部及全身臨床表現、病原體直接觀察、特異性抗體檢測和聚合酶鏈反應等檢查。
1.病原學檢查:
1)塗片染色法:
在疾病的急性期,血液、腦脊液、尿和乳汁中均可有滋養體存在。將這些標本離心,沉澱物作塗片,可通過姬氏染色在顯微鏡下觀察。慢性期可通過活組織檢查,於蘇木精-伊紅染色或銀染色後進行觀察。
2)動物接種分離或細胞培養:
取患者的樣本接種於敏感的動物腹腔內,一周後取腹腔液在顯微鏡下進行檢查,或接種於離體培養的單層有核細胞後進行觀察。
2.血清學方法:
在多數情況下,弓形體病原學檢查比較困難,且陽性率不高,因此,多借助於血清學檢查。但是單純的血清學方法不能確定診斷,特別是對懷疑眼弓形體病的患者,血清抗弓形體抗體檢測僅能作為診斷參考,更為重要的是應進行眼內液弓形體抗體的檢測。
常用的血清學檢查方法有Sabin-Feldman染料試驗、補體結合試驗、血細胞凝集反應、免疫熒光素標記抗體試驗、酶聯免疫吸附試驗、免疫印跡試驗和免疫吸附凝集試驗。
1)Sabin-Feldman染料試驗:
此是檢測抗弓形體抗體的準確試驗方法,其他檢測方法往往以此方法作為校正標準。其原理為將患者的血清或其他體液與補體和活的弓形體一起培養,加入染料以定量抗體。此試驗可以檢測到早期的感染,對急性期和慢性期感染均有良好的敏感性和特異性。但由於此種方法使用活的有毒力的弓形體,鑒於安全考慮,許多實驗室已不用此種檢測方法。
2)補體結合試驗:
在循環抗體有較高水平時,補體結合試驗有較高的敏感性,並對觀察抗體水平的升高有幫助,主要用於獲得性弓形體感染的診斷。但在感染的早期和慢性期,此種試驗的診斷價值有限。因此此種檢測方法應與其他方法聯合應用。
3)血細胞凝集反應試驗:
血細胞凝集反應試驗對急性期和慢性期均有較高的敏感性和特異性,但是在不同實驗室此種試驗有很大的變異,對早期感染和先天性感染的診斷價值不大,因此應與其他試驗聯合應用。
4)免疫熒光素標記抗體試驗:
免疫熒光素標記抗體試驗簡單易行,可以確定早期抗體水平升高,可以對IgM和IgG定量,是一種常用的檢測方法。但在交叉反應抗體存在時,它不能得出明確的結果,如類風濕因子可以造成假陽性IgM結果,抗核抗體也可造成IgM、IgG假陽性結果,對巨細胞病毒、EB病毒、甲型肝炎病毒、二期梅毒等的交叉反應也可造成IgM假陽性結果。
5)酶聯免疫吸附試驗:
此種試驗方法有很高的敏感性和特異性,是目前最常用的檢測方法。雙夾心法在檢測IgM時優於免疫熒光素標記抗體試驗,並且類風濕因子、抗核抗體等也不影響檢測結果。其敏感性很高,可以在感染後數月內測到IgM抗體,並且用其可以觀察感染後IgM的變化。
6)免疫吸附凝集試驗:
此種檢測方法可以同時檢測抗弓形體IgA和IgM抗體,有很高的敏感性和特異性。IgA的消失通常快於IgM。在慢性期IgA通常不存在,二者同時存在往往提示有急性感染,因此對孕期原發性感染的診斷有重要價值。
7)免疫印跡試驗:
免疫印跡試驗有很高的敏感性,對先天性弓形體感染的診斷有重要價值。
3.聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR):
聚合酶鏈反應是體外大量擴增特異DNA序列(或基因)的一種方法。其過程與細胞內DNA複製基本相似,此種反應需要一個目的DNA序列,一對引物和4種三磷酸脫氧核糖核苷酸和耐熱的DNA多聚酶。
羊水PCR檢測對宮內弓形體感染有幫助。對房水和玻璃體進行PCR檢測,可用於眼弓形體病的診斷,腦脊液檢測可用於弓形體顱內感染的診斷。
4.其他實驗室檢查:
血常規檢查對先天性感染有一定的幫助,患者通常有貧血、血小板減少、白細胞減少或增多、嗜酸性粒細胞增多。獲得性感染也可出現中等度的嗜酸性粒細胞增多,並可出現轉氨酶升高。顱內弓形體感染者的腦脊液壓力升高、顏色變黃、淋巴細胞增多和蛋白濃度升高。
1)熒光素眼底血管造影檢查(FFA)和吲哚青綠血管造影檢查:
眼弓形體病的活動性病灶,熒光素眼底血管造影早期顯示病灶中央弱熒光,之後出現熒光素滲漏。瘢痕病灶因視網膜色素上皮增殖可出現早期弱熒光,或因視網膜色素上皮萎縮而表現為透見熒光。不規則的視網膜色素上皮萎縮和增殖則導致斑駁狀外觀,晚期則出現病灶邊緣染色。神經視網膜炎或神經炎患者通常出現視盤邊緣強熒光。伴有視網膜血管炎的患者可見血管滲漏和後期血管壁染色,還可發現視網膜內動靜脈短路、視網膜脈絡膜短路、黃斑囊樣水腫、脈絡膜新生血管膜等病變。吲哚青綠血管造影可顯示活動性病灶部位早期出現弱熒光或強熒光,晚期表現為強熒光。還可發現檢眼鏡和熒光素眼底血管造影不能發現的早期複發性病變。
2)CT和磁共振檢查:
可發現腦內鈣化和腦病變,此對顱內弓形體感染的診斷有重要幫助。