新生兒出血症患兒凝血酶原時間及部分凝血活酶時間延長(凝血酶原時間為對照的2倍以上便有診斷意義)，但出血時間、血小板計數正常。有條件的單位可直接測定血中維生素K水平。
為鑒別嘔吐物中的血是吞入母血抑或胃腸道出血，可作Apt試驗：取吐出物1份加水5份，攪勻後靜置或離心(2000轉/min)10min，取上清液5份加1%氫氧化鈉(0.25N)1份，混勻後靜置2min，上清液仍為粉紅色，說明血中含較多胎兒血紅蛋白(HbF)，出血來自新生兒;如上清液轉變為棕黃色，則是吞入的母血。因為新生兒Hb的80%～90%為HbF，成人的Hb97%為成人血紅蛋白(HbA)，HbF具有抗堿作用。
必要時應作B超、CT及MRI檢查。如疑有顱內出血者，進行B超、CT或MRI檢查有助於診斷，不僅可以了解出血情況、確定出血部位、範圍，還可隨訪療效，進行預後判斷。
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