棘阿米巴性角膜炎檢查
1.10%KOH濕封片檢查 取病灶區角膜刮片組織、棘阿米巴原蟲的培養物或手術切除的角膜材料,塗於或鋪於載玻片上,加1滴10%KOH溶液,普通顯微鏡下清晰顯示該原蟲的雙層壁包囊形態。該方法簡單、實用,適合基層醫院開展。有條件的醫院可采用Hemacolor染色、三重染色、Calcoflour white等其他染色方法檢查。
2.棘阿米巴原蟲培養 將角膜刮片組織放入2%無營養瓊脂表麵滴1滴活的或死的大腸埃希杆菌肉湯於接種物表麵,放35℃溫箱內培養,一般於3~7天可繁殖出大量的棘阿米巴原蟲。通過倒置顯微鏡可直接觀察到棘阿米巴原蟲的滋養體和包囊,以及棘阿米巴原蟲在溫蒸餾水中形成棘突的狀態。
3.免疫熒光技術檢查 目前至少有8種棘阿米巴原蟲可引起人類角膜炎,可應用不同種的棘阿米巴原蟲抗體通過間接免疫熒光方法對棘阿米巴原蟲進行種別鑒定。目前,我國還沒有這類抗體,如必要可送往美國疾病控製中心(CDC)進行鑒定。
4.病理切片染色檢查 材料取自環鑽鑽取的角膜病變組織和手術切除的角膜病變組織,經固定、脫水、浸蠟、包埋、切片,然後再經蘇木精-伊紅(HE)或過碘酸-Schiff(PAS)染色。通過上述兩種方法染色可清晰的顯示角膜內棘阿米巴原蟲的包囊。通過病理檢查還可驗證刮片或原蟲培養的結果。根據需要和條件也可對病理切片經吉姆薩、瑞氏、三重和Calcoflour white等染色方法進行診斷。
5.共焦顯微鏡直接檢查 上述檢查方法均屬創傷性診斷技術。為了獲取組織,需在病灶部位采取,造成角膜一定的損傷。最近推出的共焦顯微鏡(confocal microscope)可直接對AK患者進行觀察,是一種無創傷、對比度高、放大率高的早期快速診斷方法,可在角膜各層(從上皮至內皮)查到棘阿米巴原蟲的影像。有時甚至可以發現棘阿米巴原蟲伸出的偽足,或不規則的神經腫脹增厚和邊緣粗糙的影像。