本病的診斷需要借助相關檢查,才可確診,以便於與其他疾病鑒別開來,以免誤診。
1、血液檢查
紅細胞和血紅蛋白增高,白細胞計數增高,中性粒細胞及大單核細胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽降低,血pH下降,尿素氮增加。治療前由於細胞內鉀離子外移,血清鉀可在正常範圍內,當酸中毒糾正後,鉀離子移入細胞內而出現低鉀血症。
2、尿檢查
少數病人尿中可有蛋白、紅白細胞及管型。
3、病原菌檢查
(1)常規鏡檢 可見黏液和少許紅、白細胞。
(2)塗片染色 取糞便或早期培養物塗片作革蘭染色鏡檢,可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。
(3)懸滴檢查 將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢,可見運動活潑呈穿梭狀的弧菌。
(4)製動試驗 取急性期病人的水樣糞便或堿性腖水增菌培養6小時左右的表層生長物,先作暗視野顯微鏡檢,觀察動力。如有穿梭樣運動物時,則加入01群多價血清一滴,若是01群霍亂弧菌,由於抗原抗體作用,則凝集成塊,弧菌運動即停止。如加01群血清後,不能製止運動,應再用0139血清重作試驗。
(5)增菌培養 所有懷疑霍亂患者糞便,除作顯微鏡檢外,均應作增菌培養。糞便留取應在使用抗菌藥物之前,且應盡快送到實驗室作培養。增菌培養基一般用pH8.4的堿性蛋白腖水,36~37℃培養6~8小時後表麵能形成菌膜。此時應進一步作分離培養,並進行動力觀察和製動試驗,這將有助於提高檢出率和早期診斷。
(6)分離培養 常用慶大黴素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強選擇性培養基,36~37℃培養8~10小時霍亂弧菌即可長成小菌落。後者則需培養10~20小時。選擇可疑或典型菌落,應用霍亂弧菌“0”抗原的抗血清作玻片凝集試驗,若陽性即可出報告。近年來國外亦有應用霍亂毒素基因的DNA探針,作菌落雜交,可迅速鑒定出產毒01群霍亂弧菌。
(7)PCR檢測 新近國外應用PCR技術來快速診斷霍亂。其中通過識別PCR產物中的霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協同菌毛基因(TcpA)來區別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然後根據TcpA基因的不同DNA序列來區別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時內可獲結果,據稱能檢出每ml堿性蛋白腖水中10條以下霍亂弧菌。
(8)鑒別試驗 古典生物型、埃爾托生物型和0139型霍亂弧菌的鑒別。
4、實驗室檢查
(1)血常規及生化檢查 Wbc↑N↑Rbc↑Na+↓k+↓cl-HCO-3↓Bun↑cr↑。
(2)尿常規鏡檢查 少許紅細胞、白血病、蛋白質、管型。
(3)糞便檢查:
①常規檢查黏液少許紅細胞、白細胞。
②塗片染色革蘭陰性彎曲弧菌。
③懸滴檢查運動活潑呈穿梭壯的弧菌。
④製動試驗堿性腖水6H生長物。
⑤增菌培養PH8.4堿性蛋白腖水36~37℃6~8H→菌膜→動力製動分離培養。
⑥分離培養O抗原的抗血清作玻片凝集試驗
(4)血清免疫學檢查 抗菌抗體抗腸毒素抗體抗凝集素。
5、常規檢查
(1)直接鏡檢
(2)分離培養:將吐瀉物直接或先經堿性腖水增菌後,接種於慶大黴素瓊脂等培養基,容易檢出霍亂弧菌。應用熒光抗體檢測糞便中霍亂弧菌,可於1~2小時內獲得結果。
(3)血清學檢查:可作血清凝集試驗。在發病第1~3日及第10~15日各取1份血清,若第2份血清的抗體效價比第1份增高4倍或4倍以上,有診斷參考價值。
(4)製動試驗—快速診斷:在急性病人的水樣便中含有大量弧菌,如懸滴檢查陽性,再滴加不含防腐劑的霍亂多價血清(使用濃度為1∶64),幾分鍾內細菌運動停止,凝集成塊即為陽性。