目前臨床對HTLV-Ⅰ或(和)Ⅱ感染的檢測多采用抗體檢測法和外周淋巴細胞病毒核酸檢測法。
1、外周淋巴細胞病毒核酸檢測
PCR：主要用於檢測標本中整合的病毒基因序列，如病毒基因兩端的長末端重複序列(LTR)、外膜蛋白(env)、gag、pol和tax序列等，設計不同的引物和探針可對HTLV-I，Ⅱ不同亞型進行鑒定，HTLV感染後病毒基因在細胞內的整合形式決定了PCR引物的選擇，一般采用兩種不同的基因引物，其中應包括LTR和/或env。PCR靈敏度和特異性都較高。常用於其它，HTLV-l/Ⅱ檢測方法的評價。PCR對整合原病毒DNA的檢測有助於動態觀察患者病程，並對患者的預後作出合理的評價。但PCR的操作複雜、成本高，且容易汙染出現假陽性。不適於常規使用。因此目前多用於HTLV感染的確證試驗。而不適於作為篩檢試劑。另外.由於HTLV感染者極少出現病毒血症。因此PCR不能用於庫存血清的檢測。
2 、HTLV抗體的檢測
由於HTLV—I和HTLV一Ⅱ基因組的同源性超過60%.兩型病毒在抗原性上高度交叉，利用HTLV—I抗原可以檢測出90%的HTLV一Ⅱ感染者。在血清學檢測，一般是利用HTLV—I抗原代替HTLV一Ⅱ。
中和試驗(NT)：抗原多采用病毒包膜糖蛋白。HTLV-Ⅰ特異性中和抗體在HAM/TSP患者的血清中最易檢測到(100%)。
酶聯免疫吸附試驗(ELISA和膠質顆粒被動血凝試驗(PA)：是HTLV—I，Ⅱ抗體檢測的初篩試驗，抗原多采用病毒特異性蛋白，采用最多的抗原是gp46、p21e、p24和pnOtax。該方法敏感性高，但特異性較低，適用於大規模的初篩鑒定。
Western blot技術：主要是通過轉印技術將病毒標準株的特異性蛋白電泳帶轉移到特定載體上，再與患者血清進行反應，從而達到檢測患者血清中HTLV特異性抗體的目的。Western blot主要用於血清篩選後的驗證試驗，也是HTLV和HIV鑒別診斷的主要方法之一。
3.病毒分離：
從患者血液中獲得淋巴細胞，經植物血凝素(PHA)或是患者的淋巴細胞細胞培養。用免疫電鏡直接觀察病毒顆粒，也可利用標準血清，通過間接免疫熒光法(IFA)、檢測細胞中的病毒抗原。混合培養多用於觀察病毒對正常T細胞的轉化作用。
