取有活動性皮損患者的末梢血作間接免疫熒光檢查，則示血循環中有抗BPAG1或BPAG2的IgG抗體。間接免疫熒光試驗的底物以豚鼠或猴的食道為宜，也可以正常人的皮膚作底物。在大皰及大皰周圍皮膚的基底膜有IgG及C3的沉積， 取皮損作直接免疫熒光檢查示基底膜有帶狀熒光(圖3)。免疫電鏡顯示免疫球蛋白沉積在皮膚基底膜的透明板。與大皰發生的部位一致。
幾乎半數以上病人有血清IgE升高，並且與IgG抗基底膜帶抗體的滴度一致，IgE抗體水平與瘙癢的程度相關。患者周圍血嗜酸性粒細胞可明顯增高。血沉可增快，血清白蛋白下降。
組織病理：在大皰邊緣皮膚的真表皮交界處，可見微小水皰存在。大皰為表皮下水皰鏡周圍的真皮乳頭部可見以嗜酸細胞為主的微腫瘤，其頂部是全層表皮。早期表皮無變性改變。大皰內含有血清、纖維蛋白和大量嗜酸性粒細胞，表皮內亦可見嗜酸性粒細胞。根據病情的程度，真皮可見血管的炎症，內皮腫脹，血管壁增厚，血管周圍淋巴細胞和中性粒細胞浸潤。在大皰邊緣和紅斑處皮膚，直接免疫熒光檢查可見線狀均勻的IgG和補體C3沉積，70%～80%左右的病人用間接免疫熒光檢查血清中有抗表皮下基底膜帶循環抗體。電子顯微鏡發現水皰位於透明板下。
