血液凝結酶是大部分病原菌株能造成的凝結酶，能使帶有肝素等抗凝劑的人或兔血液產生凝結的酶類物質，發病株大部分能造成，是辨別葡萄球菌有沒有高致病的關鍵指標值。
血液凝結酶相對分子質量為80449.3，等電點為8.82，耐溫性強，100℃30Min依然維持特異性，可被胰蛋白酶毀壞。橙黃色葡萄球菌血液凝結酶有二種遍布：一種代謝至菌身體之外的，稱之為分散凝結酶（free coagulase）；另一種存有於菌體植物細胞上，稱之為融合凝結酶（bound coagulase）或彙集因素（chumping factor）[1]。血液凝結酶具備較強抗原性，漫性橙黃色葡萄球菌感染病人血液可以檢驗到很多血液凝結酶抗原的存有。血液凝結酶能被別人血液中的協作因素（cofactor）激話變為凝血酶類似物，從而催化反應可溶纖維蛋白原變成不可溶遊離脂肪酸，進而使血液凝結。不可溶遊離脂肪酸包囊在菌體表層，在其維護下菌體既能免遭血細胞中除菌物質的功效，也可以抵禦巨噬細胞的吞幢。
橙黃色葡萄球菌造成的感染便於局限性化和產生靜脈血栓，不常產生全身感染，這與凝結酶息息相關。血液凝結酶實驗是分辨橙黃色葡萄球菌的發病力的關鍵方式，另外也是橙黃色葡萄球菌最重要的鑒別手段。
血液凝結酶的檢驗最常見的方式是兔血液凝結法，標準操作步驟以下：
用鹽水將兔血細胞1:5稀釋液，取化0.5 mL稀釋液後的兔血細胞添加到試管嬰兒中，加上0.3 mL待測液，試品和血細胞混和勻稱置37℃恒溫培養箱內，每間距30 min觀查1次結果。該實驗需要另外做己知試品的呈陽性、陰性對照。若6 h內試品管出現凝結，陽性對照管出現凝結，陰性對照管不凝結，才可分辨試品為呈陽性。
常見問題
1.每過30 min理應立即觀查，由於一些菌種可造成葡萄球菌蛋白激酶，葡萄球菌蛋白激酶是一種溶化學纖維胰蛋白酶，可讓己彙集的血液再次融解，如不立即觀查便會造成假陰性結果。
2.應用的血液應是無菌檢測血液，假如血液受溶血性真菌感染則會造成假陰性，假如血液受自然環境中的橙黃色葡萄球菌環境汙染則會造成陽性。
3.不能在高鹽培養液上挑取菌體立即開展血液凝結酶試驗，由於鹽能使血液自凝造成 陽性。
4.理應應用BHI新鮮塑造物，置放時間太長的塑造物內血液凝結酶促反應會減少造成 假陰性。
